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谷氨酸脫氫酶(GLDH)ELISA 試劑盒

簡要描述:谷氨酸脫氫酶(GLDH)ELISA 試劑盒 Glutamate dehydrogenase Assay Kit!本公司長期經營代理試劑盒,價格實惠,質量保證,價格請咨詢在線人員。

  • 產品型號:GLDH
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2018-07-04
  • 訪  問  量:344

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谷氨酸脫氫酶(GLDH)ELISA 試劑盒

競爭法

  1. 競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:

  2. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體

  3. 加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

  4. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來。

  5. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。

    當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA。

    谷氨酸脫氫酶(GLDH)ELISA 試劑盒

  6. 應用于ELISA

    親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯起來,就可大提高ELISA的敏感度。

    親和素-生物素系統在ELISA中的應用有多種形式,可用于間接包被,亦可用于終反應放大??梢栽诠滔嗌舷阮A包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結合,通過親和素-生物素反應而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結合點充分暴露。另外,在常規ELISA中的酶標抗體也可用生物素化的抗體替代,然后連接親和素-酶結合物,以放大反應信號。

  7. 工作原理本試劑盒采用雙位點夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),測定樣品中的水平。向預先包被抗體的酶標孔中加入標準品、待測樣本和HRP標記的抗體,經過溫育和洗滌,去除未結合的組分,然后再加入底物A、B,產生藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺與樣品中的濃度呈正相關。

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